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HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)(编号:BLE015-4B)

HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)



产品分类

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  • HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)(编号:BLE015-4B)

  • 英文名称
    /
  • Cas 号
    /
  • EC 编号
    /
  • 来源
    大肠杆菌(E.coli)
  • 包装
    1KU/1ml
    20KU/20ml
    100KU/100ml
  • 库存
    3000
  • 购买数量
  • 价格
    0.00元

HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)是一种在大肠杆菌中重组表达带HisMBP双重标签的半胱氨酸蛋白酶,能够特异性切割氨基酸序列Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓-Gly-Pro,去除融合蛋白的HisMBP或者其它标签的蛋白酶。HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)酶切上述序列标签蛋白后,在目的蛋白的N端仅有一个额外的Gly/Ser氨基酸残基,最大限度地减少了对目的蛋白结构和功能的影响。

HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)适用于酶切带有HisMBP标签的重组蛋白,因为酶切后没有完全酶切的重组蛋白、切除的His/MBP标签以及HRV3C蛋白酶 (His+MBP标签)都可以结合于NiMBP纯化介质上而被除去,穿柱液中则含有所需的靶蛋白。

HRV3C蛋白酶的切割效率可能因切割位点周围的序列、构象和靶蛋白的溶解度而变化,可以使用更高温度(37℃)下更多的HRV 3C蛋白酶或更长的切割时间来实现高切割效率。同时,该蛋白酶在4°C仍具有活性,可在低温下操作,不影响目的蛋白质的活性或稳定性。

产品名称HRV3C蛋白酶(His+MBP标签)

酶学编号/                          CAS编号/

  大肠杆菌(E.coli              溶液(含50%甘油)

  1U/μl                          ≥95%SDS-PAGE

单位定义

1个活性单位(U)是指4℃pH7.5条件下反应16h,能够切割100μg对照底物95%以上所需要的酶量

  

生物工程下游技术中融合蛋白酶切使用的重要工具酶

可用于HRV3C蛋白酶识别位点的融合蛋白的切割

 

贮藏条件

温度:-25~ -5保存 (注:避免温度低于-25℃发生冻结;若长时间冻结会导致活性部分丧失)

有效期:24个月

推荐使用方法:

1.1×HRV 3C Buffer中,加入100μg融合蛋白和一定量的HRV 3C蛋白酶。

2.4℃恒温反应16小时后,取20μl上述反应液,置于单独的EP管中。

3.向上述EP管中各加入20μl 2X SDS Loading Buffer,样品煮沸5min,取10μl进行SDS-PAGE分析。

4.有些蛋白需要在低温环境下展开实验,这时可以通过延长酶切作用时间或者增加3C酶的用量,来达到完全消化融合蛋白的目的,一般在不增加酶的用量的情况下,酶切过夜也能达到效果

推荐使用条件

储存缓冲液25 mmol/L Tris-HCl (pH8.0), 150 mmol/L NaCl, 0.5 mmol/L EDTA, 1mmol/L DTT, 50% (v/v)甘油

10×HRV3C Buffer250 mmol/L Tris-HCl (pH 7.5), 1.50 mol/L NaCl, 5 mmol/L EDTA, 10 mmol/L DTT

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